非焚烧技术医疗废物消毒效果检测与评价方法浅析

　　摘要：通过对非焚烧技术医疗废物消毒效果检测中存在的诸多问题的细致梳理,根据非焚烧技术医疗废物消毒处理技术和处理方式的特点，参考国内外的标准指南初步编写了各种非焚烧技术医疗废物消毒效果的检测与评价方法,以期为我国非焚烧技术医疗废物消毒效果检测标准的制定提供参考依据。

　　关键词：非焚烧技术；医疗废物；消毒效果检测；评价

　　目前，医疗废物处理主要以焚烧技术为主，随着对环保事业越来越重视，非焚烧技术有了长足的进步。但在多年对非焚烧技术医疗废物处理设备消毒效果的检测中发现，检测方法存在很多问题，特别是由于没有消毒效果的检测与评价标准，各个检测机构根据自己的理解进行检测，导致检测方法不规范，可操作性和可重复性较差，影响了对非焚烧技术医疗废物消毒效果评价的准确性，从而阻碍了非焚烧技术的推广应用。本文提出了目前非焚烧技术医疗废物消毒效果检测中存在的问题，并根据这些问题，参考国内外的相关标准指南，初步编写了各种非焚烧技术医疗废物消毒效果的检测与评价方法，为我国非焚烧技术医疗废物消毒效果检测与评价标准的制定提供参考依据。

　　1医疗废物消毒处理技术

　　由于近些年对环境治理非常重视，相对于焚烧技术，非焚烧技术具有设备体积小、消毒效果好、不产生大量的二噁英，对环境污染小，废气废水排放符合环保要求，有些设备还可以满足偏远交通不便地区、海岛医院、野战医院、疫情期间方舱医院等医疗废物就地处置的需求。故非焚烧技术在国际上得到广泛应用，日趋成为发展主流[1]。目前常用的非焚烧技术有高温蒸汽消毒、高温干热消毒、环氧乙烷消毒、微波消毒、干化学消毒、高温+微波、湿热+干热和辐照消毒灭菌等，这些技术已在国内20多个省市得到了应用。

　　2非焚烧技术医疗废物消毒效果检测中存在的问题

　　非焚烧技术除了消毒因子不同外，还有处理方式的不同，例如：医疗废物在柜室内旋转混合或静止处理；在处理流水线上连续处理或在柜室内分批处理。在处理顺序上分为先破碎后消毒或先消毒后破碎；破碎后医疗废物残渣的大小也不一致。根据处理方式不同，检测方法也应有针对性的变化。但近5年来，在对国内几十个医疗废物处理机构的检测中发现，由于国内尚无非焚烧技术医疗废物消毒效果的检测方法，导致了在对其消毒效果的检测中存在诸多问题。

　　（1）样品量不足，试验次数不够；有些检测机构对医废消毒处理设备进行检测时，样品量达不到要求，有的甚至每次试验只放1～2个样品，消毒试验只做1次。

　　（2）芽孢选择不当，对双重消毒因子的处理设备，未经比较只选择一种芽孢进行检测，例如，对于湿热+干热或湿热+微波的医疗废物消毒处理设备检测时，有的检测机构只用嗜热脂肪杆菌芽孢进行处理效果的检测，没有考虑干热或微波消毒灭菌处理时，枯草杆菌黑色变种芽孢的抗力更强的问题。因为嗜热脂肪肝菌芽孢对湿热消毒灭菌抗力较强，但对干热和微波消毒其抗力不及枯草杆菌黑色变种芽孢，故对于湿热+干热或湿热+微波的医疗废物消毒处理设备进行消毒效果检测时，需使用上述两种芽孢进行测试。

　　3非焚烧技术医疗废物消毒处理效果检测与评价方法

　　3.1通用要求

　　3.1.1对细菌芽孢或生物指示物的要求

　　（1）细菌芽孢的选择压力蒸汽、高温蒸煮消毒应使用嗜热脂肪杆菌芽孢（ATCC7953），干热、环氧乙烷、微波和化学消毒应使用枯草杆菌黑色变种芽孢（ATCC9372），辐照消毒应使用短小芽孢杆菌芽孢ATCC27142[5?8]。

　　（2）细菌芽孢的含量和抗力要求压力蒸汽消毒用嗜热脂肪杆菌芽孢载体含量应为1×106～5×106cfu/载体，在（121±0.5）℃的条件下，D值应≥1.5min。干热灭菌用枯草杆菌黑色变种芽孢为1×106～5×106cfu/载体，在160℃条件下，D值应≥2.5min。环氧乙烷消毒用枯草杆菌黑色变种芽孢应为1×106～5×106cfu/载体，在环氧乙烷浓度为（600±30）mg/L,作用温度为（54±1）℃，相对湿度为60%±10%的条件下，D值应≥2.5min。微波用枯草杆菌黑色变种芽孢应为1×106～5×106cfu/载体。辐照消毒用短小芽孢杆菌芽孢ATCC27142应为1×106～5×106cfu/载体，后两者尚未见对其抗力要求的报道。

　　（3）使用相应的自含式生物指示物，芽孢含量除压力蒸汽灭菌生物指示物为≥1×105cfu/载体，其它生物指示物均应≥1×106cfu/载体。对各种生物指示物抗力的要求同上。

　　3.1.2对载体的要求根据消毒处理设备对医疗

　　废物消毒处理的程序不同，可分为先破碎后消毒和先消毒后破碎两种情况。

　　（1）对先破碎后消毒的设备，可使用的载体为输液管A（内径为3mm、长度为20mm）用于干化学消毒；使用输液管B（内径3mm、长度为设备说明书中规定的最长破碎长度）用于化学消毒剂消毒和微波消毒；使用玻璃纤维片（10mm×10mm或5mm×20mm）或聚四氟乙烯管腔（内径为2～3mm、长度为20mm或设备说明书中规定的最长破碎长度）用于干热消毒；使用滤纸片或布片（10mm×10mm）或输液管B用于压力蒸汽消毒灭菌。也可以根据消毒因子的不同使用相应的生物指示物。

　　（2）对先消毒后破碎的设备，应使用不锈钢针（直径0.4mm，长度20mm）作为载体与模拟管腔（输液管去掉针头部分，内径为3mm、长度为1.9m）配合使用。

　　3.2医疗废物高温蒸汽消毒处理效果检测方法

　　3.2.1实验器材

　　（1）实验菌株：嗜热脂肪杆菌芽胞（ATCC7953）或嗜热脂肪杆菌芽孢生物指示物，含菌量和D值应符合3.1.1的要求。

　　（2）载体：不锈钢针，直径为0.4mm，长度20mm，滤纸片或布片，面积10mm×10mm。

　　（3）培养基：嗜热脂肪杆菌芽孢恢复琼脂培养基。

　　（4）洗脱液：含0.1%吐温80的磷酸盐缓冲液（0.03mol/L，pH7.2）

　　（5）模拟管腔：去掉针头的一次性输液管，内径为3mm，管腔总长度1.9m。

　　（6）布袋：布袋A，大小为120mm×100mm，用于放置染菌载体或自含式生物指示物；布袋B，大小为180mm×120mm，用于放置盘好的模拟管腔。

　　（7）刻度吸管：刻度为1.0、5.0、10.0mL。（8）移液器：量程为10、20μL及配套的塑料吸头。

　　（9）无菌平皿：直径90mm。

　　（10）培养箱：56℃恒温培养箱。

　　（11）模拟医疗废物：按厂家说明书中标明的可被消毒物品，准备未经使用的各种医疗用品，数量应符合满载的要求。

　　3.2.2染菌载体的制备方法

　　（1）按3.1.1

　　（2）的含量和抗力要求自行制备或购买芽孢，用胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB)稀释制备好的芽孢，制成芽孢悬液，芽孢含量为108～109cfu/mL。

　　（2）对先破碎后消毒的设备，可直接使用压力蒸汽用生物指示物。

　　（3）对先消毒后破碎的设备，按3.1.2（3）6）的要求制备染菌载体。

　　3.3医疗废物化学消毒处理效果检测方法

　　3.3.1实验器材

　　（1）实验菌株：枯草杆菌黑色变种芽孢（ATCC9372）。

　　（2）消毒因子：化学消毒剂或干化学消毒。（3）中和剂：根据不同的化学消毒剂选择适宜的中和剂。

　　（4）洗脱液：含0.1%吐温80的磷酸盐缓冲液（0.03mol/L，pH7.2）。

　　（5）培养基：胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA）。

　　（6）载体：输液管A，内径为3mm，长度为20mm或输液管B（内径3mm、长度为说明书中规定的最长破碎长度）。

　　（7）其他实验器材同3.2.1（7~9）。

　　（8）培养箱：37℃恒温培养箱。

　　（9）模拟医疗废物：干化学消毒法为：5%的有机原料（如汉堡包、肉包子、馒头）和95%塑料、纤维和玻璃等，其它化学消毒剂消毒法按厂家说明书中标明的可被消毒物品，准备未经使用的各种医疗用品，数量应符合满载的要求。

　　3.3.2实验方法

　　（1）染菌载体的制备方法1）按3.1.2（3）1）制备芽孢悬液。

　　2）对于干化学法消毒，按3.1.2（3）3）制备染菌载体。

　　3）对于其它化学消毒剂消毒，按3.1.2（3）

　　4）制备染菌载体。（2）中和剂鉴定试验按卫生部《消毒技术规范》（2002年版）[9]中的方法进行中和剂鉴定试验。

　　3.4医疗废物微波消毒处理效果检测方法

　　3.4.1实验器材

　　（1）实验菌株：枯草杆菌黑色变种芽孢（ATCC9372）。

　　（2）染菌载体：输液管，规格见3.1.2(1）。（3）微波漏能检测仪（检测消毒仓室微波有无泄漏）。

　　（4）洗脱液、培养基和培养箱同3.3.1（4）（5）（8）。

　　（5）其他实验器材同3.2.1（7~9）。

　　（6）模拟医疗废物：按厂家说明书中标明的可被消毒物品，准备未经使用的各种医疗用品，数量应符合满载的要求。

　　3.4.2染菌载体的制备方法

　　（1）按3.1.2（3）1）制备芽孢悬液。

　　3.5医疗废物高温干热消毒处理效果检测方法

　　3.5.1实验器材

　　（1）实验菌株：枯草杆菌黑色变种芽孢（ATCC9372）或菌片式干热生物指示物。

　　（2）载体：10mm×10mm玻璃纤维片。

　　（3）不锈钢丝网：放置染菌载体用。

　　（4）洗脱液、培养基和培养箱同3.3.1（4）（5）（8）。

　　（5）其他实验器材同3.2.1（7~9）。

　　（6）模拟医疗废物同3.4.1（6）。

　　3.5.2染菌载体的制备方法

　　（1）按3.1.2（3）1）制备芽孢悬液。（2）按3.1.2（3）

　　2）制备染菌载体。

　　3.6医疗废物环氧乙烷消毒处理效果检测方法

　　3.6.1实验器材

　　（1）实验菌株：枯草杆菌黑色变种芽孢（ATCC9372）。

　　（2）载体：直径为0.4mm、长度为20mm的不锈钢针。

　　（3）模拟管腔：去掉针头的一次性输液管,外径为4mm内径为3mm，总长度1.9m。

　　（4）布袋：大小为18cm×12cm，用于放置含染菌载体的模拟管腔。

　　（5）其他实验器材同3.5.1（4~6）。

　　3.6.2实验方法

　　（1）染菌载体的制备方法1）按3.1.2（3）1）制备芽孢悬液。

　　2）按3.1.2（3）6）制备染菌载体。

　　4结语

　　目前非焚烧技术医疗废物消毒效果检测中存在诸多问题,无法正确反映非焚烧技术医疗废物处理设备实际的消毒效果。本文根据非焚烧技术医疗废物消毒处理技术和处理方式的特点，参考国内外的标准指南，初步编写了各种非焚烧技术医疗废物消毒效果的检测与评价方法,以期为今后非焚烧技术医疗废物处理设备消毒效果检测及我国非焚烧技术医疗废物消毒效果检测标准的制定提供参考依据。

　　参考文献

　　[1]沈德林.医疗废弃物非焚烧处理技术[J].消毒学杂志,2009:26(1)62?64.

　　[2]环境保护总局.医疗废物高温蒸汽集中处理工程技术规范（试行）HJ/T276—2006[S].北京:环境科学出版社,2006:6.

　　[3]环境保护总局.医疗废物微波消毒集中处理工程技术规范（试行）HJ/T229—2006[S].北京:环境科学出版社,2006：7.

　　[4]环境保护总局.医疗废物化学消毒集中处理工程技术规范（试行）HJ/T228—2006[S].北京:环境科学出版社,2006:7.

　　[5]生辉.枯草杆菌芽孢生物监测在消毒供应中心的应用[J].中外医学研究,2012,10（25）:146?147.

　　孔丽娜，周娟，武晓娜，李新武

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